استخراج اگزوزوم از سللاین فرایندی استاندارد برای جداسازی وزیکولهای خارجسلولی (Exosomes/Small EVs) از سوپرناتانت کشت سلول است که در مطالعات پیامرسانی بینسلولی، بیومارکرها، دارورسانی، ایمنیدرمانی و ارزیابی عملکرد EVها کاربرد کلیدی دارد. در این سرویس، سوپرناتانت جمعآوریشده پس از کشت سلولی تحت مراحل پیشتصفیه و جداسازی قرار میگیرد تا جمعیتی غنی از وزیکولهای کوچک با حداقل آلودگیهای سلولی/پروتئینی حاصل شود. کیفیت این مرحله بهشدت به شرایط کشت (بهویژه استفاده از FBS دپلتهشده از EV)، تراکم سلولی، مدت زمان جمعآوری و نحوه نگهداری نمونه وابسته است و برای تولید خروجی قابل اتکا در آزمایشهای پاییندستی اهمیت دارد.
برای طراحی صحیح و افزایش بازده و خلوص، لازم است اطلاعات زیر ارائه شود: نام سللاین و شرایط کشت (مدیا، درصد FBS و اینکه EV-depleted هست یا خیر)، تعداد پلیت/فلاسک و حجم تقریبی سوپرناتانت قابل جمعآوری، زمان و دفعات برداشت (Single/Multiple harvest)، وضعیت تیمارها (دارو/سیتوکاین/هیپوکسی/ترنسفکشن و …) و گروههای کنترل، و هدف پاییندستی (RNA/miRNA، پروتئین، uptake assay، functional assay، یا ذخیرهسازی بیوبنکی). همچنین باید مشخص شود سوپرناتانت به چه شکلی تحویل میشود (تازه، فریز شده در −80∘𝐶، وجود/عدم وجود debris) و آیا نیاز به کنترلهای کیفی مدنظر هست یا خیر.
در پایان سرویس، نمونه اگزوزومی استخراجشده بهصورت سوسپانسیون در بافر مناسب (معمولاً PBS/بافر توافقشده) و در حجم و غلظت قابل استفاده برای کاربردهای پژوهشی تحویل میشود. در صورت درخواست، گزارش کنترل کیفیت میتواند شامل دادههای کمی (غلظت/تعداد ذرات)، ارزیابی اندازه توزیع ذرات، و/یا مستندسازی هویت EVها با مارکرهای اختصاصی باشد تا قابلیت استناد برای پایاننامه و مقاله افزایش یابد. همچنین در صورت نیاز، راهنمای نگهداری و شرایط فریز/ذوب و توصیههای کاربردی برای تستهای پاییندستی (مثل استخراج RNA، ELISA، functional assays) ارائه میشود.
